Nombre oficial de la organización: Hospital Clínico Universitario de Santiago de Compostela.

Titularidad de la organización: Pública.

Denominación del grupo : Grupo de Investigación en Neurociencias Clínicas.

Investigador Responsable: Tomás Sobrino.

Persona de contacto: Tomás Sobrino.

Página web: http://www.linc-stg.eu

Unidad de Citometría de Flujo Sorter y Cultivos Celulares

Características:

• 2 LASERS: Láser 488 nm (azul) y láser 633 nm (rojo).


• 9 parámetros: FSC, SSC y 7 Fluorescencia (5 LASER azul, 2 LASER rojo).


• Adquisición de muestra con control de Temperatura.


• Separación hasta 70000 células por segundo .


• Separación hasta 4 poblaciones en diferentes soportes.


• Medidas de embudo: 70 i 100µm.


• Software FacsDiva por PC.


• Dos Campanas de Bioseguridad Telstar Bio-II-AP.


• Dos Incubadores de Células Memert IN108.


• Centrífuga Refrigerada Eppendorf 5804R.


• Microscopio Olympus IX51 con fluorescencia (verde, rojo, ultravioleta) con software de Captura y Procesamiento de imágenes y Microscopio Olympus IX41.


• Sistema de hipoxia in vitro para cultivos celulares.

Unidad de Resonancia Magnética

La imagen por Resonancia Magnética es quizás la técnica de neuroimagen más versátil que existe hoy en día. El uso de esta plataforma en sus diferentes variantes: anatómica, funcional, espectroscopia e imagen molecular, permite realizar un seguimiento completo, no invasivo ( in vivo ) y longitudinal en el tiempo de procesos relacionados con las enfermedades neurovasculares y otros tales como plasticidad, reorganización y recuperación funcional o neuroreparación en modelos animales. Los equipos específicamente diseñados para el trabajo con pequeños animales, permite trabajar a un campo magnético mucho más elevado, y con técnicas más agresivas que en sistemas de imagen clínicos convencionales. Por ello, y debido sobre todo a la mayor sensibilidad y resolución de estos equipos, es posible la realización de estudios de imagen molecular, mediante sondas de contraste (nanopartículas específicamente diseñadas), para lograr un contraste inmuno-específico in vivo.

EQUIPAMIENTO DISPONIBLE DE MRI de 9.4 T

Boca de 20 cm (rata y ratón) Gradientes de campo XYZ de 400 mT/m 4 canales de recepción de radiofrecuencia ("parallel imaging") Imagen: Espin-Eco, Rare, Gradiente-Eco, MDEFT, FISP, EPI, fMRI DTI, Angio, Difusión, Perfusión (sin contrastes), CINE, Imagen espectroscópica (CSI), etc.

Unidad de Proteómica

La proteómica se encarga del estudio global de la expresión proteica por parte de una célula, tejido u organismo en un momento determinado del tiempo. Dentro de esta disciplina se encuadran la electroforesis bidimensional y la espectrometría de masas. La electroforesis bidimensional nos permite la separación de un conjunto complejo de proteínas en un gel bidimensional. En una dimensión, las proteínas se separan mediante su punto isoeléctrico y en una segunda dimensión, por peso molecular.

De este modo se obtienen un patrón de puntos o "spots" característicos de cada muestra, en los que cada "spot" pertenece a una única proteína. La comparación de dos patrones bidimensionales distintos, como por ejemple el patrón proteico de un tejido sano y el correspondiente tejido enfermo, nos permite identificar alteraciones en la expresión proteica que surgen como consecuencia de la patología. Este hecho permite identificar marcadores de diagnóstico, pronóstico o incluso biomarcadores para la elección de un tratamiento.

Equipamiento Electroforesis 2-DE:

• Protean IEF System.


• Experion system.


• Criterion.


• Protean II XL.


• Mini-PROTEAN 3.


• Mini Trans-Blot Cell.


• CRITERION DODECA CELL.


• EttanDalt Six.


• DODECA STAINER S y L.


• CRITERION BLOTTER.


• TransBlot SD.

Equipamiento de Adquisición y análisis de imagen:

• DENSITÓMETRO GS800.


• IMAGER FX PRO PLUS.


• Software: Quantity One y PDQUEST 2D.

Unidad de Genómica

El LINC cuenta con una Unidad de Genómica en la que se llevan a cabo:

• Estudios de expresión génica, para determinar cómo se altera la expresión de uno o varios genes en determinadas condiciones experimentales (inhibicón /represión), viendo su correlato con la expresion proteica.


• Estudios de polimorfismos , para identificar aquellas variantes en la secuencia normal de un gen, responsables de las alteraciones en su expresión.

Con este fin contamos con las siguientes infraestructuras:

• PCR a tiempo real Stratagene Mx3005P, con 5 filtros de fluorescencia, lo que nos va a permitir reacciones de multiplex para la caracterización simultánea de la expresión de varios genes.


• Termociclador Biometra TProfessional Gradient, necesario para llevar a cabo las reacciones de amplificación de ácidos nucleicos, tanto para estudios de expresión como para secuenciación.


• Extractor automatizado de ácidos nucleicos (DNA y RNA) Magnapure Compact de Roche Diagnostics, que permite realizar la extracción automatizada de ADN y ARN de 8 muestras simultáneas de sangre, tejido, cultivos celulares, etc, en 25 minutos con alto grado de pureza y rendimiento.


• Cuantificador Nanodrop.

Unidad de Cirugía Experimental

La unidad de modelos animales del laboratorio de Investigación en Neurociencias Clínicas (LINC) consta de las siguientes plataformas:

Estabulario

Habitación de 7 m2 con control de ciclo circadiano, temperatura y humedad. RackS y jaulas para estabular un máximo de 50 ratas y 50 ratones. Armario de control de humedad y temperatura con presión negativa para ratones transgénicos.

Plataforma de cirugía animal

Equipo para microcirugía experimental dotado de un microscopio Olympus™ SZX2-FO y un microscopio LEICA, 3 dispensadores de Sevofluorano Penlon™ OX14-3PH, 2 sistemas de columnas para la regulación de la entrada de gases Hersill™ H3 (O2, N2O y aire), 2 tornos para microcirugía Strong™ 207, 2 electrocoaguladores Alsatom™ SU-140 MPC, bomba de infusión Samtronic™ 690, Criostato Tissue-Tek Cryo3, Doppler Perimed Periflux System 5000, Control Gating Module para MRI de SA Instruments Inc., Sistema Multichanel Systems para MRI funcional, Quantum SpectraLife.

Unidad de Bioquímica

Aparato de HPLC (High Perfomance Liquid Cromatography). Controlador. Thermo Finnigan. Spectra System SN4000. Degasificador. Thermo Finnigan. Spectra System SCM1000. Bomba . Thermo Finnigan. Spectra System P4000. Autosampler. Thermo Finnigan. Spectra System AS3000. Detector PDA . Thermo Finnigan. Spectra System UV6000LP. Software . ChromQuest4.1 Centrífuga Eppendorf 5810R. SpeedVac RVC 2-18. Sistema de agua ultrapura Arium 611. Dos baños Watc Bath DK-S22. Incubador Refrigerador FOC 225I. Dos estufas de 37ºC INDELAB.

Robots de diagnóstico. Determinación de interleuquinas, quimioquinas, citoquinas, péptidos natriuréticos. IMMULITE 1000. DPC ELECSYS 2010. Roche Diagnostics. Concentrador de vacio. Christ Freeze Dyers. Concentración de las muestras para posterior utilización en el aparato HPLC. Lavador y lector de placas ELISA. Lector BIOTEK ARCONES DE -80º C Heraeus HFU686 Top con unidad de emergencia de CO2: almacenamiento de muestras de la seroteca y banco de ADN de ictus del CHUS. Congelador Vertical -20 ºC Liebherr Confort y Nevera Bosh.

Personal fijo

Número Doctores: 6.

Número Licenciados: 0.

Número Diplomados: 0.

Número Técnicos: 0.

Número Otro Personal: 0

Personal Contratado

Número Doctores: 5.

Número Licenciados: 6.

Número Diplomados: 1.

Número Técnicos: -.

Otro Personal : 1.

• Biobanco de ADN y muestras de suero de más de 3500 pacientes con ictus isquémico o hemorrágico.
• Unidades clínicas de referencia nacional: Unidad de patología cerebrovascular compleja, Unidad de movimientos anormales, Unidad de epilepsia refractaria, Unidad de Patología neuromuscular y Unidad de enfermedades desmielinizantes.
• Modelos in vivo de enfermedad: isquemia y hemorragia intracerebral, enfermedad de Alzheimer…
• Modelos in vitro de isquemia cerebral y enfermedad de Alzheimer.
• Desarrollo de sistemas teranósticos.
• Técnicas singulares de imagen anatómica, espectroscópica y molecular por Resonancia Magnética, así como citometría de flujo sorter (ver página web: http://www.linc-stg.eu/servicios.aspx).
• Distintas líneas de células madre: iPSCs, células madre mesenquimales, células progenitoras neurales c17.2, células progenitoras endoteliales, etc...